奶牛胚胎移植注意事项 (奶牛胚胎移植技术流程)

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• 奶牛胚胎移植注意事项
• 胚胎工程中冲卵的方法
• 肉牛养殖如何使用胚胎移植技术？

奶牛胚胎移植注意事项

选择适宜的受体牛应选择体型较大、性情温顺的个体作为受体牛。

在实际生产中，改良牛较适宜，最好是西门塔尔牛的杂交改良后代。

从年龄上看，以3~6岁的经产母牛为佳，lO岁以上的老龄牛不能选用。

初产牛必须达到性成熟以后，年龄应在l6月龄以上，体重达成年体重的75%的个体方可选用。

要求受体牛是健康无病的个体，尤其是无生殖系统疾病。

体膘过肥或过瘦、卵巢发育不良、生殖器官有炎症、人工授精不受孕的母牛，都不宜做受体牛。

在发情阶段适时移植母牛不发情，就不能排卵形成黄体，也不能进行胚胎移植。

所以要在母牛发情阶段适时移植。

发情周期不正常的受体牛，不适宜做胚胎移植。

短期优饲在移植前6~8周，要对受体牛进行科学补饲，使肌体达到最佳繁殖状态。

每天补饲精料2.5千克，所补饲的精料要求营养丰富、品质优良，同时，还应注意维生素a、维生素d、维生素e和微量元素及矿物质饲料的供给。

注意环境条件及物品消毒胚胎操作室要求干净、无灰尘、无异味，因此，最好在移植前进行紫外线消毒，所有器械、用品需经严格消毒处理，摆放要井然有序，便于使用。

工作人员的手臂，在操作前要用酒精棉消毒。

做好受体牛的发情观察发情观察在胚胎移植工作中非常重要，是确定移植时间的依据。

非手术法胚胎移植是在发情后第七天进行。

发情观察要定人、定时，而且观察人员要有丰富的经验。

每天分早上、上午、下午及晚上4次观察，每次l小时，准确记录每头母牛的发情表现及发情时间。

黄体检查在移植前，要对受体牛进行直检，确定黄体发育情况。

好的黄体凸出卵巢表面，质地柔软，有弹性，直径在l公分以上，底部充实。

个别牛卵巢偏小，所形成的黄体也较小，但质地的弹性和柔软程度都很好，这样的牛也可进行胚胎移植。

注意检查动作要轻，不要用力挤压，以免弄伤受体牛。

胚胎操作应严格按程序进行甘油冷冻胚胎的操作程序：解冻解冻液移植液装管装枪，而乙二醇冷冻胚胎解冻后直接装枪，不需要其他操作程序。

麻醉剂量适当麻醉的目的，一是为了减轻移植对受体牛的刺激，使其安稳。

二是防止直肠努责，便于操作。

麻醉采取尾椎麻醉方式，如果麻醉部位靠后或剂量不足，直肠努责就得不到抑制。

如果剂量过大，使直肠扩约肌过度松弛，就会在体内形成大的管状空腔，有的后肢麻痹站不起来，给移植带来不便，甚至无法移植。

要熟练掌握胚胎移植操作技术胚胎移植是将早期胚胎移植到生理状态相同的受体牛体内，使之继续发育。

一般是在胚胎发育第七天进行移植。

移植部位是黄体发育较好－侧子宫角的上l/2至下l/3，如有可能则越深越好。

要求操作人员要在短时间内将胚胎移植到位，原则上不超过lO分钟。

同时要注意两手的协调性，避免在移植过程中擦破子宫内膜。

胚胎质量要有保证胚胎质量是决定移植是否成功的重要因素之一，只有好的胚胎オ能获得较高的受胎率。

实践中，移植的胚胎质量须达到b级以上，冷冻胚胎要选择a级胚胎。

要选择适宜的移植季节和时间胚胎移植要避开酷暑和严寒的影响，最佳移植时间是3~5月和lO~l1月。

为提高群体受胎率，可重复移植据资料介绍，受体牛可连续进行2次胚胎移植，2次移植没有成功，不可再做受体牛。

胚胎工程中冲卵的方法

有电脉冲刺激，但一般用激素法让其超数排卵，用细管和生理盐水冲。

胚胎的收集是利用冲卵液将胚胎由生殖道中冲出，并收集在器皿中。

收集胚胎有两种方法，即手术法和非手术法，前者可用于各种家畜胚胎的收集，后者仅适用于牛、马等大家畜，且只能在胚胎进入子宫角后收集。

收集胚胎时应考虑配种时间、排卵的大致时间、胚胎运行的速度和发育阶段等因素。

只有这样才能顺利地完成胚胎的收集过程，并得到较高的胚胎回收率。

各种家畜授精后胚胎发育的速度和运行情况见表。

胚胎收集的时间不应该早于排卵后的第一天，最早应在受精卵完成第一次卵裂之后，否则不易辨别卵子是否受精。

收集时间一般在配种后的3～8天，牛最好是在配种后的6～8天，即胚胎发育至桑椹胚或者早期囊胚，以便非手术法收集和移植。

1．手术法收集胚胎 根据畜种的不同及外科手术的要求，在腹中线或腹侧作一切口，先将一侧输卵管及子宫角移出腹腔，用注射器吸取冲卵液注入输卵管或子宫角内进行冲洗，并观察卵巢上的排卵情况。

然后将该侧送回腹腔，并移出另一侧，用同样方法进行冲洗。

手术法冲洗胚胎有以下几种方式（图10－2）。

一种方式是用注射器的磨钝针头刺入子宫角顶端，注入冲洗液，然后再输卵管的伞部接取冲卵液，这种方式适用于牛、羊、兔等。

另一种方式冲洗的方向与此相反，即由伞部注入冲洗液，在子宫角上端接取。

猪和马的子宫角与输卵管的接合部有一活塞结构，用第一种方式，冲洗液不易通过，因此多采用第二种方式。

上述两种方式是当胚胎还处于输卵管时采用。

当确认所有的胚胎都已进入子宫角内时，可采用冲洗子宫角的方式，即从子宫角上端注入冲卵液，由基部接取，或者相反。

这种方式适合于各种家畜。

冲卵液用量以子宫角容积大小而异。

冲卵操作，要求迅速准确，以防止对伤口、生殖器官和冲卵液的污染，力求避免给动物带来刺激和对生殖器管造成损伤。

一般来说，术后生殖器官容易发生不同程度的粘联，严重时会造成不孕，这是手术法收集胚胎最大的缺点。

冲洗之后，应立即缝合伤口，母畜应单独饲养，并随时观察其伤口的愈合情况。

图：file:///D:/Temporary%20Internet%20Files/5/H35I9WWZ/1002%5B1%2．非手术法收集胚胎 牛、马也可采用非手术法收集胚胎，由于它比手术法简单易行，而且对生殖器官的伤害程度较小，因此在生产中较多采用此法(图10-3）。

图10-3、10－4：母牛非手术收集胚胎示意图：牛的非手术法收集胚胎可利用双通式或三通式导管冲卵器，其差别在于双通式采卵器冲卵液注入和流出是经同一管道完成的，而三通式采卵器冲卵液的注入和流出是经过两个不同的管道完成的。

无论是双通式还是三通式，其外管前端均连接一气囊。

当冲卵器插入子宫角内时，充气冲卵液流入子宫体并沿着子宫颈口流出。

每侧子宫角需冲卵液100～500ml。

冲卵液的导出应顺畅迅速，并尽可能将冲卵液全部收回。

为此，冲卵时最好用手在直肠内将子宫角提高并略加按压，以利于冲卵液流出。

胚胎的回收率与冲卵液回收的完全程度呈正相关。

应用非手术法收集胚胎时，只有当胚胎都进入子宫角后方可进行。

显然，这种方法无法收集停留在输卵管内的胚胎，因此，用非手术法收集牛、马的胚胎时，一般在配种后的6～8天进行。

收集胚胎的冲洗液有多种，主要有杜氏磷酸盐缓冲液（D-PBS），布林斯特氏液，合成输卵管液（SOF），惠屯氏液，Ham’s F－110以及TCM－199，尤以D-PBS最常用。

它们除含有多种盐外，还含有多种有机成分，不但可用于胚胎收集，还可用于胚胎体外培养，冷冻保存及解冻等。

收集胚胎的冲洗液可不含牛血清白蛋白，培养和保存时则需加入，或以胎犊血清代替。

血清白蛋白的含量一般为0.3～1％，犊牛血清需在56℃时持续灭活30分钟，冲卵液、培养液中血清的含量一半分别为5％、10～20％。

肉牛养殖如何使用胚胎移植技术？

胚胎移植技术在肉牛养殖中的应用，旨在加速品种改良、提高生产效率并保存品种资源，具体体现在以下几个方面：加速品种改良。

通过胚胎移植，一头良种母畜能够在较短时间内产生大量后代，大幅提高其在育种工作中的意义。

这种方法有助于加速良种的推广与优化。

提高生产效率。

在肉牛业中，胚胎移植技术可以诱发双胎。

向已配种的母畜移植胚胎，即使母畜未受胎，也可能因接受移植的胚胎而妊娠，进而提高双胎的出生率，进一步提高生产效率。

节约成本并保存品种资源。

通过胚胎的运输替代种牛的引进，显著降低了购买和运输成本。

同时，胚胎的保存方式为牛品种资源的保存提供了可能，确保了遗传资源的持续利用。

胚胎移植操作需遵循特定原则，以确保移植过程的成功与胚胎生命力的保护：环境一致性。

移植前后，母畜所处环境应与胚胎发育阶段相适应，以确保胚胎在母畜体内顺利发育。

收集与移植期限。

胚胎收集与移植的期限应控制在周期黄体寿命内，最迟在周期黄体退化之前数日进行，通常为供体发情配种后3~8天。

排除不良因素。

在整个操作过程中，应确保胚胎不受物理、化学、微生物等不良因素的影响，以维持胚胎的生命力。

胚胎移植的实施步骤包括供体和受体母牛的同期发情、供体母牛的超数排卵与配种、胚胎的收集、检查与保存，以及胚胎的移植。

通过非手术法收集胚胎，使用特定的冲洗液进行冲洗，并在室温或37°C下静置以检查胚胎数量与发育状况。

随后，将发育正常的胚胎收集并备用或储存。

胚胎移植技术还包括胚胎冷冻、胚胎分割、体外受精和核移植等繁殖新技术，这些技术在实践中已取得成功，但目前仍处于研究阶段，尚未广泛应用于实际生产。