植物基因工程的应用 (植物基因工程常用载体)

畜牧业知识 2025-02-08 76

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植物基因工程的应用

问题一:论述植物基因工程的应用1)高产、稳产和具优良品质的品种 用基因工程的方法可以改善粮食作物的蛋白质含量。

如“向日葵豆”植株。

2)抗逆性品种 将细菌的抗虫、抗病毒、抗除草剂、抗盐碱、抗干旱、抗高温等抗性基因转移到作物体内,将从根本上改变作物的特性。

如转基因抗虫棉。

(从杂草控制、抗虫、抗病毒、品质改良、生物固氮和抗寒等方面论述了植物基因工程在农业中的具体应用。

通过基因工程获得的植物已开始在农业生产上大面积推广应用 ,并取得了较好的经济效益、社会效益和环境效益 ,在解决人类所面临的资源短缺、环境恶化、效益衰退三大难题中显示出越来越重要的作用 ,为农业的持续、稳定发展提供了强有力的保障。

ki/...07) 问题二:基因工程有那些应用成果?1)植物基因工程成果:抗虫转基因植物(抗虫棉是转入Bt毒蛋白基因培育的) 抗病转基因植物(病毒外壳蛋白基因、病毒复制酶基因) 抗逆转基因植物(生物的抗性基因)转基因改良植物(营养价值、实用价值、观赏价值) (2)动物基因工程成果:提高动物生长速度(外源生长激素基因) 改善畜产品的品质 转基因动物生产药物(牛、山羊等动物乳腺生物反应器中表达了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素、α-抗胰蛋白酶) 转基因动物作器官移植的供体(导入调节因子,抑制抗原决定基因表达或除去抗原决定基因培育没有免疫排斥反应的转基因克隆器官) 基因工程药物(利用转基因工程菌生产细胞因子、抗体、疫苗等) 问题三:基因工程种植的植物对人体有什么影响?专家们认为,由于转基因作物能更好地防治病虫害,抵御干旱,提高产量,营养成分高,因此发展前景十分广阔。

到 2015年,全球人口将增至90亿,只有提高农业生产率才能满足人类对食品的需求,而现代生物技术无疑是提高农业生产率的重要手段之一。

人们还可利用基因技术生产速生鱼类和医药工业所需的疫苗等,以满足人类的生活需要。

但专家们也强调,发展转基因食品必须有严格监督、科学检验、国际立法,以避免它对人类健康和环境造成损害。

转基因食品是通过遗传工程改变植物种子中的脱氧核糖核酸,然后把这些修改过的再复合基因转移到另一些植物种子内,从而获得在自然界中无法自动生长的植物物种。

上世纪 80年代末,科学家们开始把10多年分子研究的成果运用到转基因食品上,1995年成功地生产出抗杂草黄豆,并在市场上出售。

又经过7年的努力,现在他们利用基因技术已批量生产出抗虫害、抗病毒、抗杂草的转基因玉米、黄豆、油菜、土豆、西葫芦等。

目前,转基因食品的主要产地是美国、加拿大、欧盟、南非、阿根廷等。

转基因食品是新事物,大多数人对它了解甚少,加之宣传不够,使人们对转基因食品的安全性存有怀疑。

国际上,尤其是西欧出现了强烈 *** 转基因食品的潮流。

欧盟对转基因食品的生产和销售制定了一系列法规,要求基因改变不得超过基因总量的 1%,市场上出售的转基因食品必须贴标签,还要求有关国际机构对转基因食品的无害性及其对环境的影响进行科学检验。

对转基因食品无害性的评估主要有以下几方面:是否有毒性、引起过敏反应、营养或毒性蛋白质的特性、注入基因的稳定性、基因改变引起的营养效果及其他不必要的功能等。

对人类健康而言,专家们认为,主要应审查转基因食品有无毒性及对环境的影响。

采纳哦 问题四:基因工程在园艺植物育种上的应用目前主要在哪些方面1.目的基因的分离或合成 2.将目的基因与载体DNA连接,构建重组DNA分 子-表达载体 3.将重组DNA分子导入受体细胞,并获得具有外 源基因的个体 4.转基因生物的检测与鉴定 5.转基因生物的安全性评价 基因工程在园艺植物育种中的应用:(1)改良品种。

(2)提高抗病虫能力。

(3)改善抗逆性。

(4)提高光合作用和固氮效率。

(5)创建雄性不育材料。

(6)延迟成熟与保鲜。

(7)选育抗除草剂品种。

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~你的采纳是我前进的动力 问题五:植物基因工程中常用的报告基因有哪些报告基因在植物基因工程中的应用 植物基因工程 在植物基因工程研究领域,已使用的报告基因有以下几种:胭脂碱合成酶基因(nos)、章鱼碱合成酶基因(ocs)、新霉素磷酸转移酶基因(nptⅡ)、氯霉素乙酰转移酶基因(cat)、庆大霉素转移酶基因、葡萄糖苷酶基因、荧光酶基因等。

nos、ocs这两个基因是致瘤土壤农杆菌(Agrobacterium tumfaciens)的Ti质粒特有的,对Ti质粒进行改造,用相应的致瘤农杆菌转化植物体时,如果外源基因转入植物体中,则这两种报告基因在植物根茎叶中均能表达,不受发育调控,检测时直接用转化体提取液进行纸电泳,染色后在紫外光下观察荧光即可。

nptⅡ、cat及庆大霉素转移酶基因,均为抗生素筛选基因,相关的酶可以对底物进行修饰(磷酸化、乙酰化等),从而使这些抗生素失去对植物生长的抑制作用,使得含有这些抗性基因的转化体能在含这些抗生素的筛选培养基上正常生长,也可以用转化体提取液体,外用同位素标记,放射自显影筛选转化体。

目前常用的一种报告基因是β-D-葡萄糖苷酶基因,该酶催化底物形成β-D-葡萄糖苷酸,它在植物体中几乎无背景,组织化学检测很稳定,可用分光光谱、荧光等进行检测。

荧光酶基因(luc)是1985年从北美荧火虫和叩头虫cDNA文库中克隆出来的,该酶在有ATP、Mg2+、O2和荧光素存在下发出荧光,这样就可用转基因植物整株或部分直接用X-光片或专门仪器进行检测。

问题六:目前,植物基因工程技术主要应用于以下哪些方面一,抗性基因工程,,抗虫 除草剂 病 逆 基因工程 二植物品质改良基因工程 三植物杂种优势的利用 四植物代谢工程 至于你信不,我明天考这玩应 问题七:植物基因工程的目的基因种类有哪些抗虫、抗病、抗旱、抗寒。

问题八:基因工程有哪些方面的应用 5分 补充一个微生物:发酵或者利用基因工珐改良菌种,生产药物。

基因工程其实需要有想象力,但凡你能想到的,比如转肌肉发育基因,可以使牛的肌肉量提高一倍;转鸡翅发育基金,可以让鸡肉长出4~8个翅膀。

植物:总的来说,有两方面,提高抗逆性(比如抗病、虫、抗自然灾害等),提高植物品质(比如让作物高产、让水果更甜、让水果变成不同的颜色等等)

植物基因工程的应用 (植物基因工程常用载体)

猪为什么进行品种改良

转载以下资料供参考品种改良猪的重要意义俗话说:“种瓜得瓜,种豆得豆”,品种在养猪成功要件中占据44%的比例,这是养猪行业所公认的,但同养猪发达国家比,我国饲养者对品种的意识却需要加强。

今年,我国政府统计数字表明,我国猪存栏为4.8亿头,出栏6.6亿头,出栏率只有136%。

而养猪发达国家出栏率在170%以上,如此低的养猪率,不能全部归咎于是疾病所造成的,冷静分析,品种的因素也起着非常重大的作用。

下面对优良种猪所产生的增值效益进行简要分析。

饲料利用率随着人民物质生活水平的不断提高,粮食问题越来越受到全世界的瞩目。

我国是世界人口最多的国家,关系国计民生的粮食问题将越来越突出。

美国经济学家布朗2005年在报告中指,“假设中国经济每年增长8%,低于中国过去26年平均年增长率9.5%,那么,到2031年,中国的人均收入将能够达到美国现在的水平3.8万美元。

所以再过26年,中国的人均收入将能赶上美国。

”可想而知,到那时,国内粮食问题解决不理想的话,中国必将从经济落后国家人民的嘴里争夺食品,所以提高畜产品的粮食转化率,降低养殖成本具有社会意义。

中国地方猪种民猪、金华猪、太湖猪平均料肉比为3.5∶1,目前外国优质长白种猪、大白种猪、杜洛克种猪的平均料肉比为2.5∶1。

优良猪种的饲料利用率高,可节省饲料,降低饲养成本。

全国猪的料肉比如果能普遍降低0.2,一头猪100千克出栏就可节省20千克饲料,全国每年就可节省1200万吨饲料。

这些节省的粮食可以用于人民增长的物质生活需要、深加工、能源等方面,有利于缓解我国潜在的粮食危机。

生长速度生长速度是评价种猪质量最重要的经济性能指标之一。

在生长速度上,优良种猪明显高于地方品种及肉质兼用型品种。

在生长肥育期内,中国地方猪种如民猪、金华猪、太湖猪平均日增重500克,而目前优质长白猪、大白猪、杜洛克猪平均日增重900克~1000克。

优良种猪150日龄可达100千克以上,而中国地方猪种达90千克则超过180日龄。

如果优良种猪比一般的种猪日增重多100克,按目前市场肥猪价格每千克8元计算,同样150天出售,则出售1头肥猪就会增加销售收入120元,年出栏万头的猪场新增收入就达120万元。

我国年出栏6.5亿多头肥猪,算一算真是惊人的数字,所以品种改良工作的意义深远。

健康优良种猪的首要条件就是安全健康,疾病传播的3个要件当中不能排除种猪广泛流通这个重要的传播途径。

健康的种猪群是安全生产的保障,一旦引进带有野毒的种猪会给企业带来严重的危害。

目前优良种猪烈性传染病的抗原检测应为阴性,这样就会大大降低养殖风险,使种猪的生产性能得到充分发挥,养殖效益最大化。

抗逆性及适应性优良的种猪具有很好的抗逆性及适应能力。

正规育种企业在育种过程中高度重视种猪的抗逆性及适应能力,育种的核心依据是满足饲养者、食品企业及消费者利益的需求,而良好的抗逆性及适应能力主要是满足饲养者的利益。

在疾病越来越复杂的情况下,育种企业对种猪的抗病力研究不断重视,养猪发达的国家如荷兰、丹麦等,随着育种技术的不断进展,高抗病力品种会对养猪产业做出更大贡献。

繁殖力现代数量遗传和分子遗传学等育种技术的运用大大提高了种猪的繁殖力,目前优良长白猪、大白猪初产平均10头左右,经产平均12头。

比原来的瘦肉型种猪的繁殖力有很大提高。

同时目前优良猪种,尤其是配套系种猪也具备乳头数多、发情明显、受胎率高、护子能力强、子猪育成率高等优良繁殖性能。

种猪好比是机器设备,能生产出更多的优质产品的设备才能被市场普遍接受。

优良的母猪每窝如果多产1头小猪,则每头母猪每年多创效益近400元,年出栏1万头的猪场新增效益就达20万元以上。

瘦肉率随着我国人民生活水平的不断提高,对健康饮食理念逐渐接受,有害健康的高胆固醇、高脂肪饮食渐渐向低能量、高蛋白方式转变,食用高营养价值瘦肉的习惯自然形成。

随着终级消费者需求的变化,脂肪型品种猪将被市场慢慢淘汰。

优良种猪的胴体瘦肉率高于中国地方猪种,外国猪种体重100千克时胴体瘦肉率达60%以上,我国地方脂肪型猪90千克时胴体瘦肉率在50%以下。

饲养相对高瘦肉率的种猪不但能适应市场的需求,而且经济效益也会明显提高。

例如,目前瘦肉率和出肉率相对高的猪每500克售价要相对多卖0.2元,每头猪按体重达100千克出售计算,年出栏万头的猪场新增利润就达40万元。

菜薹种质资源创新有哪些方面?

一、传统方法在菜薹种质创新中的应用

现有菜薹种质资源主要来源于常规途径,常规技术中应用最多的方法是系统选育法,即根据育种目标对原始材料中的不同株系进行多次选择、比较鉴定,筛选出优良的种质。

利用这种方法,广东省广州市蔬菜科学研究所选育出四九心-19号,四九心-20号,其中四九心-19号产量比四九心增产1950~3900kg/ km2,叶色较深绿,主薹高度增加6~8cm,除耐热、耐湿外,还较耐霜霉病和菌核病,是目前菜薹常规品种中种植面积最大的早熟品种之一。

十月红菜薹则是由胭脂红中发现的优良单株经过系谱选育而得,曾是湖北省的主栽品种,且被推广到长江流域各省。

华南农业大学植保系筛选出抗病毒病品种60天特青,然后对60天特青经单株选择的20多个不同株系进行田间比较,选出代号为8722的中花菜心品种,后来又对8722菜心进行优质、丰产、耐病毒病的系统选育,筛选出8722选菜心新品种。

油绿50天菜心则是利用四九菜心与50天菜心杂交选育的151菜心为母本,以60天菜心为父本,杂交后经过连续8代自交选育而成(张华等,2005)。

张华等(2005)于1999年利用迟心2号与60天油青菜心杂交,经连续6代自交系选出叶薹油绿、商品性较理想的油绿701品种。

雄性不育是高等植物中普遍存在的一种现象,十字花科芸薹属作物杂种优势明显,采用雄性不育系制种是此属作物利用杂种优势的主要途径之一。

回交转育是获得优良雄性不育系的最常用的方法。

李大忠(2002)从福州市地方菜薹品种七叶心自交后代中发现不育株。

经过一代测交,三代回交后,不育株率稳定在50%左右,获得雄性不育两用系66A。

用66A与小白菜杂交,杂种一代的一般性状偏向小白菜,表现出较强的生长优势,尤其是可食用部分较父母本增长了1~2倍;品质却偏向菜薹,略带甜味,柔软可口。

赵利民等(2005)以大白菜CM S为不育胞质供体,以柳州早菜薹为受体,通过杂交、连续回交方法育成菜薹胞质雄性不育系TC。

TC植株生长发育正常,不育性稳定,雌蕊功能正常,蜜腺发育健全,自然授粉结实良好,经济性状优良,配合力高,综合抗病性强。

许明等(2003)利用大白菜核不育 作为不育源,以紫菜薹ZB3 为目标亲本,经过杂交、自交、兄妹交等转育手段,将雄性不育基因转育到紫菜薹中,获得紫菜薹“甲型”两用系、临时保持系和雄性不育系。

而且笔者采用同样的方法,将核不育基因向菜薹品种转育,得到了含有早-49遗传基因的新甲型两用系、临时保持系和雄性不育系(许明等,2006)。

王玉刚等(2005)亦通过杂交、自交等方法,将白菜雄性核不育性向菜薹可育品系03S001(翡翠油青菜心)中转育,获得了新的菜薹100 %核不育系及其相应的甲型两用系和临时保持系。

二、远缘杂交在菜薹种质创新中的应用

菜薹和油菜的AA组染色体相同,且其种间杂交有低度育性,为将油菜雄性不育基因转育到菜薹上提供了条件。

刘胜洪等(2006)的试验表明:杂交后代的花药不育率为F1代<BC1代<BC3代,在BC3代群体植株中,不育率为94.60%,接近BC2代植株不育率水平,说明在不断的回交过程中,植株的不育率越来越高并相对稳定。

晏儒来、向长萍等(2000)于1988年开始向紫菜薹转育波里马油菜雄性不育系,以甘蓝型油菜和紫菜薹的杂种作母本,最初用大股子作转育亲本,经过4年6代的转育选择,于1992年秋从240个测交种中获得不育率达100%且性状相对稳定的材料3 份,即0-1、0-2-2、28-9 及其相应的保持系5 -1-4、5-1-3 和29-4-2。

为了改良上述不育系的综合性状,1995年以抗病、早熟、耐热和菜薹无苦味为主要改良目标性状,选用了OF 系统(十月红2号×四九菜心)的一些早熟株系和十月红2号的一些株系为转育亲本。

选用9405的F2 中19个不育株作母本杂交,在后代中坚持选不育率高的测交种,再从中选不育性彻底,生长势较强,早、中熟,抗病性强,且无苦味的不育株。

经过3年6 代的选择,于1997年秋育成不育率达100%且综合性状较好的不育系9617、9630、9631 及其相应的保持系。

其中9617 自播种至开始采收为40~45d,9630 为50d,9631 为55d左右。

刘自珠(1996)利用甘蓝型油菜雄性不育株为不育源、菜薹为转育父本,通过种间杂交、连续回交,选育出菜薹胞质雄性不育系002-8-20A及相应的保持系049-20B。

该不育系结实正常,不育株率和不育度达到93%以上,已用于杂种一代组合的配制。

张成合等(2003)将菜薹同源三倍体与二倍体相互杂交,3x×2x的结籽率为34.78%,2x×3x的结籽率为26.17%。

经染色体检查,杂交子代植株绝大多数为非整倍体,其中三体植株占33.3%(3x×2x)和40.70%(2x×3x)。

经细胞学鉴定和核型分析,从三体植株中初步鉴定出三体3、三体7、三体8和三体9 等4 种初级三体。

这些都是难得的遗传材料。

黄邦全等(1999)通过种间杂交将Ogura 萝卜雄性不育细胞质导入了紫菜薹,通过连续回交获得了叶色正常、蜜腺正常的紫菜薹Ogura细胞质雄性不育系。

黄邦全(2002)以Ogura细胞质雄性不育紫菜薹(AA,2n=20)为母本,以不同萝卜品种(RR,2n=18)为父本进行杂交,获得了大量的属间杂种。

杂种F1幼苗在低温下子叶及真叶均不缺绿,以红萝卜为父本获得的杂种F1植株叶柄、叶脉呈紫红色;以白萝卜为父本获得的杂种F1植株叶柄和叶脉不呈紫红色。

所有的杂种F1植株都开白花,蜜腺正常。

雄配子高度不育,但是雌配子具有部分育性。

杂种F1花粉母细胞的染色体数目为预期的2n=19,染色体平均配对构型为15.53Ⅰ+1.34Ⅱ+0.25Ⅲ+0.01Ⅳ,多数染色体以单价体的形式存在,但也有一些二价体、三价体甚至四价体,最多达到6Ⅰ+3Ⅱ+1Ⅳ,参加配对的染色体数达13条,表明A染色体组和R染色体组具有一定的同源性,萝卜染色体上的有利基因可以通过部分同源重组或者代换进入到紫菜薹中。

同时,在F1中发现了2株染色体自然加倍的双二倍体。

双二倍体与未加倍的杂种F1都表现为父本萝卜的白花性状,蜜腺正常,低温下子叶不黄化。

虽然双二倍体在减数分裂过程中能形成具有19条染色体的配子,双二倍体的花药比未加倍的杂种F1发育要好得多,但是双二倍体的育性还是低于未加倍的杂种F1。

尽管未加倍的杂种F1在减数分裂时多数染色体以单价体的形式存在,同时也有二价体、三价体甚至四价体的形成,并且存在落后染色体和染色体桥。

黄邦全(2002)以OguraCMS紫菜薹×萝卜杂种F1(AR,2n=19)为母本,以甘蓝型油菜(AACC,2n=38)为父本进行杂交,获得了8 株杂种植株。

其中1株(PRN-1)的花色为嵌合体,该植株上的花多为黄色,但是也有乳白色花,另外还有1朵花甚至1个花瓣上同时具有黄色和白色区域,其余3株(PRN-2、PRN-3、PRN-4)都开白花。

PRN-4的花药开花前退化,其余3株都可以看到3~6枚花药,能够产生部分花粉,但是PRN-2的花粉不能被I2-KI溶液染色。

PRN-2具有4个蜜腺,PRN-1和PRN-3具有2个蜜腺,PRN-4无可见蜜腺。

在低温下,PRN-2叶色正常,其余3株幼叶表现不同程度缺绿。

PRN-1的染色体数目为2n=38,PNR-2的染色体数目为2n=35,PRN-3的染色体数目为33,PRN-4的染色体数目未能确定。

它们的染色体平均配对构型各不相同。

与甘蓝型油菜回交后,PRN-1、PRN-2、PRN-3 植株各自产生了一定数量的种子,而PRN-4则未产生种子。

梁红等(1994)用杂种胚离体培养的方法获得了菜薹与甘蓝的正反交F1代。

杂种一代的一般性状介于两亲本之间,偏向父本,并表现出强烈的生长优势。

其蛋白质含量普遍超亲,游离氨基酸含量和还原糖含量介于两亲本之间,或超过高亲亲本。

郑岩松等(2003)研究了芥蓝以及芥蓝×菜薹种间杂种后代对芜菁花叶病毒(TuMV)油菜株系的抗性。

结果表明,芥蓝对广东省广州地区TuMV油菜株系具有近于免疫的抗性。

芥蓝×菜薹种间杂种回交后代抗TuMV油菜株系的选择效应受回交亲本影响很大:用抗病品种与杂种回交的后代,经两次系统选择后,已获得16个经济性状较好的抗病品系;但用感病品种与杂种回交两代之后,抗病性明显下降。

三、物理化学诱变在菜薹种质创新中的应用

诱变育种是利用理化因素诱发植物发生变异,通过选择育成新品种的方法。

尚爱芹等(1999)利用不同浓度的秋水仙素对二倍体菜薹种子和幼苗生长点进行不同时间长度的浸泡,结果表明,用0.1%秋水仙素水溶液处理幼苗生长点48h的诱变效果最好,诱变率可达26.67%,浸泡种子效果不佳,最高诱变率仅为4.0%。

四倍体植株结籽率较二倍体明显降低,平均达42.3%,而八倍体植株几乎是完全不育的。

随着染色体组的增加,花粉粒大小和叶片保卫细胞中的叶绿体数均显著增加,与二倍体(CK)比较,四倍体植株生长旺盛,花薹的产量和品质均有所提高。

廖飞雄等(2001)利用60Co-γ射线辐射菜薹种子,发现对预先浸泡1h的菜薹种子来说,适宜的处理剂量为200~300Gy。

廖飞雄等(2003)对60Co-γ射线辐射后的菜薹器官进行离体培养时,发现对菜薹种子的适宜辐射剂量是200Gy左右,经过催芽的种子适宜剂量为50~100Gy,离体培养茎尖可用40~70Gy。

四、生物技术在菜薹种质创新中的应用

(一)体细胞变异体离体筛选

组织培养得到的再生植株以一定频率发生变异是一种普遍的现象,这便是利用植物体细胞变异体离体选择法对作物现有品种进行有限的修饰与改良的基础。

通过这种方法,已成功地筛选出耐盐水稻、抗稻瘟病细胞突变体、抗除草剂大豆等一系列有价值的突变体,在作物遗传改良方面发挥了重要作用。

在植物耐热性筛选研究中与传统的耐热性选择方法相比,离体筛选方法具有不受季节和气候条件限制、变异范围广、选择群体大、节省土地和人力等特点,可显著提高种质资源创新的效率。

何晓明等(1999)进行了菜薹耐热性离体筛选的研究,结果表明,耐热性不同的菜薹品种对离体培养中的热胁迫反应亦有所差异,35℃培养30d的无菌苗存活率可以作为菜薹耐热离体筛选的选择指标。

通过热胁迫交替选择,从热敏菜薹品种中,初步筛选出3个耐热无性系A -2、B -1、B -8。

这些无性系耐热品系在热胁迫中的茎尖存活率基本保持在60%~80%,而未经筛选的无性系茎尖的存活率平均仅为20. 83%,因此经过筛选的无性系的耐热性有了明显改善。

同时还发现,经9 代培养和4次热胁迫筛选,这3个无性系的耐热性均表现比较稳定,表明这种耐热性可以在无性繁殖过程中传递下去。

通过热胁迫选出的无性系其茎尖繁殖系数也较原群体有所提高。

廖飞雄等(2003)在离体筛选耐羟脯氨酸变异的研究中,发现对菜薹茎尖和愈伤组织来说,经0.3mg/ml的羟脯氨酸3~4个周期筛选后,可获稳定抗性株系。

菜薹种子萌发后的幼苗在1.0mg/ml浓度上,经4个世代连续筛选可获抗性株系。

3mg/ml浓度可用于幼苗的前期淘汰。

入选系耐羟脯氨酸的能力和耐热性提高。

廖飞雄等(2004)利用“六十天特青,离体筛选出的一个菜薹耐羟脯氨酸选择系Hypr01,发现在人工气候箱模拟栽培高温逆境下,Hypr01和未经选择的六十天特青相比,有较强的耐热性。

(二)基因工程

徐秉芳等(1996)研究报道紫菜薹的花粉经低温水合、热激、渗激三步程序,分离出大量具萌发能力的脱外壁花粉,脱外壁率可高达60%以上。

在含有碳源与氮源及Roberts 培养基盐成分的碱性PEG培养基中,首次使芸薹属脱外壁花粉萌发,萌发率可达41%。

这使得利用花粉作为外源基因的媒介进行植物遗传的转化有了重要的突破。

施华中(1995)以花粉特异启动子Zm13-260 控制的Gus 基因作为报告基因,用电激法分别转化紫菜薹花粉原生质体和花粉粒,通过瞬间表达检测,比较了二者的转化效果。

结果表明,花粉原生质体的电激导入效果比花粉粒高,前者的Gus 基因瞬间表达水平远远高于后者,Gus 基因活性是后者的10倍。

并探讨了Gus 基因在不同发育时期花粉原生质体中的时序表达特性,花粉愈幼嫩,Zm13 的启动活性愈低。

张国裕等(2006)以建立的菜薹高频再生体系为基础,利用GUS染色组织分析法研究了根癌农杆菌菌株、乙酰丁香酮(A S)、预培养时间、浸染时间和共培养时间等因素对菜薹(B rassica camp estris L. var. pchinesis)子叶遗传转化的影响,探讨了适宜菜薹转化的卡那霉素与抑菌抗生素使用浓度。

结果表明,农杆菌菌株A GL0 对菜薹的浸染能力最强,添加乙酰丁香酮有利于菜薹转化;子叶外植体预培养2d 后浸染(菌液浓度OD 600值为0.8)15min,共培养2d,然后转移到含15mg/L 卡那霉素和100mg/L T icarcillin 的筛选培养基上,进行转化植株的再生,植株再生率及外植体GUS 阳性率均较高,是较优的转化条件;该试验共获得8 株转化植株,转化率达2.44%,经PCR分析和Southern 杂交检测表明,Gus基因已整合进入菜薹基因组。

张扬勇等(2003)通过对农杆菌介导法将韧皮部特异表达启动子RSs-1(Rice sucrose synthase-1,水稻蔗糖合成酶)与雪花莲凝集素(Galanthus nivalid agglutinin,GNA)基因构成的嵌合基因转化菜薹,获得转基因植株。

该试验目的是利用雪花莲凝集素对刺吸式昆虫有较好的抗虫效果,采用延迟筛选抗生芽的方式,最终得到了抗生植株,并通过了分子检测。

通过基因工程的手段进行菜薹种质的创新还刚刚起步,随着菜薹转基因体系的逐步完善以及克隆的有用基因越来越多,该技术在菜薹种质改良中的应用将越来越广泛。

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